新國(guó)標(biāo)中有幾個(gè)問題得到了盧老師的回答,感謝盧老師和大弟子的幫忙,由于前段時(shí)間忙,所以到現(xiàn)在才發(fā)上來(lái)和大家一齊分享。當(dāng)時(shí)跟盧老師是通過電話溝通,可能轉(zhuǎn)述有不完整或不妥當(dāng)?shù)牡胤剑MR老師指正。也希望其他論壇的大蝦一齊討論。
1.菌落總數(shù):6.2.2提到可以覆蓋一層瓊脂以防蔓延菌的生長(zhǎng),但這樣會(huì)不會(huì)影響專性需氧菌的生長(zhǎng)?
答:有一點(diǎn)影響,但是影響不大。因?yàn)?mL的瓊脂厚度不大,氧氣還可以滲透進(jìn)去。
2.LST肉湯和BGLB肉湯分裝為10mL,這個(gè)量是不是個(gè)規(guī)定值?和稀釋度有關(guān)系嗎?
問這個(gè)問題主要是我們一直的做法都是隨意加,就算03年乳糖膽鹽規(guī)定分裝的毫升數(shù),但是我們一直沒有按規(guī)定的量執(zhí)行。
答:如果分裝不按規(guī)定的量,加上樣液后,肉湯的濃度就會(huì)改變,會(huì)影響抑菌的效果。
3.雙岐桿菌菌落計(jì)數(shù)需要做革蘭氏染色和過氧化氫酶試驗(yàn),但新標(biāo)準(zhǔn)里沒有了詳細(xì)說(shuō)明,是不是還按舊標(biāo)準(zhǔn)挑5個(gè)可疑菌落做鑒定?做革蘭氏染色的適合是挑48h培養(yǎng)物,那樣會(huì)不會(huì)有革蘭氏不定型的情況出現(xiàn)?
答:挑5個(gè)或10個(gè)做染色和過氧化氫酶都可以,似乎菌落的多少而定,多的就取多點(diǎn)。雙岐桿菌染色本來(lái)就陰性和陽(yáng)性會(huì)同時(shí)存在,雙岐桿菌培養(yǎng)會(huì)不停的產(chǎn)酸,可能有些會(huì)死掉。
4.乳酸菌的菌落計(jì)數(shù)分成不同菌采用不同的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件,但如果樣品中幾種菌都有,那就需要全部培養(yǎng)基都用上,那么最后的結(jié)果應(yīng)該怎樣計(jì)算?
答:取最大值的那個(gè)進(jìn)行計(jì)數(shù)。兼性厭氧條件下生長(zhǎng)的在厭氧條件下生長(zhǎng)的更好。
5新的標(biāo)準(zhǔn)中涂布的都規(guī)定了用L形涂布棒,那為什么不能用三角形呢??jī)烧哂惺裁磪^(qū)別嗎?
答:都可以用,不是原則問題。
6.大腸桿菌在VRB-MUG平板上描述為發(fā)藍(lán)色熒光的菌落,是菌落發(fā)熒光嗎?還是菌落周圍發(fā)熒光?我做了幾次實(shí)驗(yàn)都是菌落周圍發(fā)熒光,咨詢環(huán)凱、陸橋的也說(shuō)是菌落周圍發(fā)熒光。
答:這個(gè)是理解的問題,該熒光物質(zhì)是水溶性的,菌落分解出熒光物質(zhì)后會(huì)擴(kuò)散到培養(yǎng)基中。
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