國家衛(wèi)生健康委員會關(guān)于《分枝桿菌消毒試驗評價要求》報批公示

分枝桿菌消毒試驗評價要求

標(biāo)準(zhǔn)解讀

一、標(biāo)準(zhǔn)制修訂的背景

分枝桿菌有特殊的細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)，對多數(shù)理化因子的抵抗力強于普通細(xì)菌繁殖體，低效消毒劑往往不能將其有效殺滅。因此能否殺滅分枝桿菌是區(qū)分中效消毒劑和低效消毒劑的關(guān)鍵點。科學(xué)有效的消毒策略對預(yù)防結(jié)核分枝桿菌的傳播至關(guān)重要，消毒劑對分枝桿菌的殺滅效果可以通過體外實驗來證明。考慮到菌株抗力代表性、致病性、試驗可操作性等因素，WS/T 327 2011《消毒劑殺滅分枝桿菌實驗評價要求》最終選擇龜分枝桿菌膿腫亞種[CMCC（B）93326 （ATCC 19977）]作為試驗菌株，選擇分枝桿菌干燥培養(yǎng)基、改良羅氏培養(yǎng)基、蘇通綜合培養(yǎng)基作為試驗用培養(yǎng)基，并依此制定試驗步驟及評價規(guī)定。

本標(biāo)準(zhǔn)修訂后，作為分枝桿菌消毒試驗評價要求推薦性國家標(biāo)準(zhǔn)，與《中華人民共和國傳染病防治法》、《消毒管理辦法》、《消毒產(chǎn)品衛(wèi)生安全評價規(guī)定》等配套，編寫格式依據(jù)GB/T 1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》給出的規(guī)則編寫。技術(shù)指標(biāo)和檢驗方法與《消毒產(chǎn)品衛(wèi)生安全評價技術(shù)要求》（WS 628）、《消毒試驗用微生物要求》（WS/T 683）、《消毒產(chǎn)品檢測方法》（WS/T 10009）等標(biāo)準(zhǔn)、規(guī)范的規(guī)定相符，在消毒應(yīng)用范圍和消毒方法上與《內(nèi)鏡消毒效果評價方法》（GB/T 38497）等標(biāo)準(zhǔn)、規(guī)范的規(guī)定相符。標(biāo)準(zhǔn)編制遵循“先進性、實用性、統(tǒng)一性、規(guī)范性”的原則，根據(jù)當(dāng)前我國對消毒產(chǎn)品相關(guān)法律法規(guī)、衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)、規(guī)范和法規(guī)性文件的要求，結(jié)合我國的實際情況制定本標(biāo)準(zhǔn)。

二、標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布的重要意義

《消毒劑殺滅分枝桿菌實驗評價要求》（WS/T 327 2011）已頒布十余年，本次為首次修訂。WS/T 327 2011實施以來，對規(guī)范用于殺滅分枝桿菌消毒劑的生產(chǎn)、檢測、評價和監(jiān)督以及保證產(chǎn)品衛(wèi)生質(zhì)量均發(fā)揮了重要作用，為防控分枝桿菌感染提供了有力技術(shù)支撐。2022年7月，上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟醫(yī)院受中國疾病預(yù)防控制中心環(huán)境與健康相關(guān)產(chǎn)品安全所委托，啟動了消毒產(chǎn)品類標(biāo)準(zhǔn)的實施效果跟蹤評價項目，采用文獻追蹤結(jié)合問卷調(diào)查的方式，對消毒劑殺滅分枝桿菌相關(guān)資料進行了收集，查閱和整理國內(nèi)外已經(jīng)發(fā)表的相關(guān)文獻及標(biāo)準(zhǔn)，調(diào)查了標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布后的執(zhí)行情況、實施情況、使用情況及主要技術(shù)內(nèi)容的貫徹實施等。調(diào)查發(fā)現(xiàn)，消毒劑生產(chǎn)單位、消毒劑使用單位（醫(yī)療機構(gòu)為主）、疾控、監(jiān)督機構(gòu)及第三方檢測機構(gòu)對本標(biāo)準(zhǔn)均有較強的使用需求和宣貫需求。此外，隨著消毒劑種類和消毒器械的不斷創(chuàng)新改革，新試驗菌株的涌現(xiàn)及新培養(yǎng)基配方的出現(xiàn)，現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)的技術(shù)要求和使用方法已不能充分滿足需求。現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)的使用方法和適用范圍已不能充分滿足使用需求。為了進一步規(guī)范分枝桿菌消毒產(chǎn)品的生產(chǎn)、經(jīng)營、使用和管理，本標(biāo)準(zhǔn)的修訂和實施是十分必要的和可行的。

三、重要指標(biāo)的制定依據(jù)

1、標(biāo)準(zhǔn)名稱和范圍的修訂

根據(jù)國家疾病預(yù)防控制局的審查意見，結(jié)合當(dāng)前我國消毒產(chǎn)品的發(fā)展趨勢，特別是近年來新型消毒器械的不斷研發(fā)，對其作用原理、毒理學(xué)安全性、消毒效果和現(xiàn)場應(yīng)用等研究已日漸成熟，因此將標(biāo)準(zhǔn)名稱修改為《分枝桿菌消毒效果評價方法》，標(biāo)準(zhǔn)名稱涵蓋消毒劑和消毒器械，適用于各種消毒劑及產(chǎn)生化學(xué)消毒因子的消毒器械對分枝桿菌的消毒效果的評價。標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容分枝桿菌消毒效果評價的基本要求、評價方法和結(jié)果判定。

2、術(shù)語和定義

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)新增消毒器械殺滅分枝桿菌相關(guān)技術(shù)要求、應(yīng)用范圍和使用方法等內(nèi)容的需要，術(shù)語和定義新增加了“物體表面模擬現(xiàn)場消毒試驗”。本文件中的模擬現(xiàn)場試驗不是在實驗室控制條件下模擬實際消毒場景，而是選擇風(fēng)險可控的密閉空間，使用分枝桿菌染菌載體進行物體表面分枝桿菌模擬消毒試驗，適用于評價消毒劑氣溶膠和產(chǎn)生化學(xué)消毒因子的消毒器械對分枝桿菌的消毒效果。目前市面上已出現(xiàn)多種產(chǎn)生或利用化學(xué)因子的消毒器械，與傳統(tǒng)使用消毒劑噴灑、擦拭不同，可以通過超聲霧化、汽化、閃蒸、干霧、彌霧等技術(shù)完成對無人條件下密閉環(huán)境中的物體表面消毒。

3、增加了“4基本要求”

考慮到分枝桿菌對多數(shù)理化因子的抵抗力強于普通細(xì)菌繁殖體，根據(jù)《實驗室 生物安全通用要求》（GB 19489）、《病原微生物實驗室生物安全通用準(zhǔn)則》（WS 233），增加了4.1實驗室要求，強調(diào)了1.分枝桿菌消毒實驗室應(yīng)符合GB 19489中生物安全Ⅱ級（BSL-2）及以上要求，采取封閉式布局，便于清潔、消毒。2.分枝桿菌消毒試驗應(yīng)在獨立房間內(nèi)進行，試驗產(chǎn)生的廢物應(yīng)使用壓力蒸汽滅菌器處理或按感染性醫(yī)療廢物進行無害化處理，使用壓力蒸汽滅菌器滅菌時排氣口處應(yīng)有防止病原微生物排入環(huán)境的措施。針對不同消毒劑和消毒器械，根據(jù)《消毒產(chǎn)品檢測方法》（WS/T 10009）、《內(nèi)鏡消毒效果評價方法》（GB/T 38497），增加了4.2試驗要求，具體可分為4.2.1實驗室試驗和4.2.2模擬現(xiàn)場試驗，完善了針對可稀釋的化學(xué)消毒劑、黏稠的消毒劑、沖洗用消毒劑和原液使用的消毒劑、產(chǎn)生化學(xué)消毒因子的消毒器械的評價方法。針對模擬現(xiàn)場試驗，增加了4.2.2.1物體表面模擬現(xiàn)場消毒試驗和4.2.2.2內(nèi)鏡模擬現(xiàn)場消毒試驗，分別用于驗證消毒劑、產(chǎn)生化學(xué)消毒因子的消毒器械對人工污染于載體表面分枝桿菌的消毒效果，及用于驗證消毒劑和清洗消毒機對人工污染于模擬內(nèi)鏡內(nèi)壁分枝桿菌的消毒效果。并在5.2.2.1載體中增加了“聚四氟乙烯”載體相關(guān)內(nèi)容。

4、修改了“5評價方法”的內(nèi)容

根據(jù)《消毒試驗用微生物要求》（WS/T 683）相關(guān)內(nèi)容，分枝桿菌消毒試驗的試驗菌株有龜分枝桿菌膿腫亞種 CMCC（B）93326或ATCC 19977、鳥分枝桿菌ATCC 15769、地分枝桿菌ATCC 15755三種試驗菌株。其中鳥分枝桿菌ATCC 15769、地分枝桿菌ATCC 15755與原“龜分枝桿菌膿腫亞種 CMCC（B）93326或ATCC 19977”相比，對各種理化因子有更強的抵抗力，能更好地檢驗消毒效果，但培養(yǎng)時間長達21天，且缺乏足夠的試驗數(shù)據(jù)支撐，因此并未納入。根據(jù)實驗室驗證，將5.1.2培養(yǎng)基中“分枝桿菌干燥培養(yǎng)基”修改為“商品化分枝桿菌培養(yǎng)基”，增加要求“按產(chǎn)品說明書儲存并在有效期內(nèi)使用”。根據(jù)《消毒產(chǎn)品檢測方法》（WS/T 10009）的5.1.2.2.2，增加了5.1.3.4.2有機干擾物的詳細(xì)說明：“用于經(jīng)過清洗或較清潔的消毒對象的消毒劑懸液定量殺菌試驗使用0.3%BSA；用于不經(jīng)過清洗或較臟的消毒對象的消毒劑懸液定量殺菌試驗使用3.0%BSA。”5.1.3.4.3：“載體浸泡定量殺菌試驗使用TSB。”在5.1.4.2恒溫水浴箱后增加了“恒溫金屬浴”，干式恒溫金屬浴采用微電腦控制，利用金屬做為導(dǎo)熱介質(zhì)，具有使用方便、精度高、體積小等特點，可以代替?zhèn)鹘y(tǒng)的水浴裝置，已廣泛應(yīng)用于各種生物醫(yī)學(xué)試驗中。

5、增加了“5.3試驗方法”下的模擬現(xiàn)場消毒試驗

為進一步完善對消毒產(chǎn)品殺滅分枝桿菌的試驗評價方法，根據(jù)《消毒產(chǎn)品檢測方法》（WS/T 10009），將原“6.2.2載體定量殺菌實驗”修改為“5.3.2.2載體浸泡定量殺滅試驗”并增加了“5.3.2.3物體表面模擬現(xiàn)場消毒試驗”，完善了驗證消毒劑、產(chǎn)生化學(xué)消毒因子的消毒器械對人工污染于載體表面分枝桿菌的消毒效果。增加了“5.3.2.4內(nèi)鏡模擬現(xiàn)場消毒試驗 用于內(nèi)鏡消毒的消毒劑和清洗消毒機，應(yīng)進行內(nèi)鏡模擬現(xiàn)場消毒試驗，按照GB/T 38497進行。”

6、修改了“6結(jié)果判定”的內(nèi)容

針對新增的物體表面模擬現(xiàn)場消毒試驗，相應(yīng)增加了結(jié)果判定“用物體表面模擬現(xiàn)場消毒試驗評價殺菌效果時，在產(chǎn)品規(guī)定使用濃度與最短作用時間時，各次試驗的所有樣本殺滅對數(shù)值應(yīng)≥3.00，可判定該產(chǎn)品對分枝桿菌污染物消毒合格。”。

7、新增了“7注意事項”的內(nèi)容

龜分枝桿菌膿腫亞種雖然廣泛分布于環(huán)境中，但作為一種非結(jié)核分枝桿菌，可以引起破損皮膚傷口感染和免疫低下人群肺部感染，嚴(yán)重時還可能引發(fā)淋巴結(jié)炎、骨髓炎等并發(fā)癥，由于其獨特的生物學(xué)特性和耐藥性，治療較為困難。在實驗室試驗和模擬現(xiàn)場試驗中均需要注意實驗室生物安全問題，特別是在培養(yǎng)物和染菌載體的轉(zhuǎn)運環(huán)節(jié)，因此在標(biāo)準(zhǔn)文末增加了注意事項內(nèi)容，強調(diào)實驗過程中的生物安全問題。

8、修改了“附錄A”的內(nèi)容

根據(jù)實驗室驗證結(jié)果，刪除了A.1改良羅氏培養(yǎng)基成分中的“馬鈴薯淀粉”。根據(jù)《消毒產(chǎn)品檢測方法》（WS/T 10009），將營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基的牛肉膏成分修改為5.0g。

附件：1.7-報批稿.pdf